维康颗粒对乳腺癌小鼠肿瘤相关性疲劳的影响及代谢机制研究

目的探讨维康颗粒(Weikang Granule,WG)对乳腺癌小鼠肿瘤相关性疲劳的影响及代谢机制。方法将40只成功接种4T1乳腺肿瘤细胞的小鼠分为肿瘤对照TC组(生理盐水灌胃,20 m L/kg,1次/日)、维康颗粒(WG)组、紫杉醇(PTX)组、维康颗粒+紫杉醇(WG+PTX)组,每组10只,给药组分别给予相应WG(6g/kg,灌胃,1次/日)及PTX(10 mg/kg,腹腔注射,隔日1次),连续干预21日。观察干预前及干预第10、20日力竭游泳时间。干预结束后取血,应用核磁共振氢谱(1H-NMR)技术获取小鼠代谢指纹图谱信息,采用PCA、PLSDA、OPLS-DA进行数据处理,观察各组血浆差异代谢物。结果与TC组比较,PTX组力竭游泳时间减少(P0.01),瓜氨酸水平升高,肌醇、磷酸胆碱、异柠檬酸、甘油磷酸酯、亚油酸、谷氨酰胺、辅酶A、天冬氨酸、丝氨酸、高半胱氨酸、赤藓糖水平下降(P0.01,P0.05);WG组力竭游泳时间延长(P0.01,P0.05),甘油磷酸酯水平升高(P0.01)。与PTX组比较,WG+PTX组力竭游泳时间延长(P0.01),神经酸、辅酶A、磷酸烯醇丙酮酸、肌醇、赤藓糖水平升高(P0.01,P0.05)。结论维康颗粒具有减轻化疗相关性疲劳的作用,其机制与促进ATP生成,并加强磷酸戊糖途径、脂肪酸代谢、糖异生相关。     

止泻退热分散片体内外抑菌实验研究

目的:评价止泻退热分散片的抑菌作用,为其临床应用提供实验数据支持。方法:体外采用最小抑菌浓度测定方法,体内采用感染致病菌的动物模型,观察止泻退热分散片的抑菌作用。结果:止泻退热分散片对体外金黄色葡萄球菌、志贺痢疾杆菌、产毒性大肠杆菌和致泻性大肠杆菌的最低抑菌药物浓度分别是1.03×10-3g/ml、9.26×10-3g/ml、3.09×10-3g/ml、2.78×10-2g/ml。给与高、中、低不同剂量止泻退热分散片后感染痢疾杆菌和产毒大肠杆菌小鼠的死亡率与模型组相比减少,差异有显著性意义。结论:止泻退热分散片具有体外和体内抑制多种肠道感染性细菌的作用。     

罗氏肾病Ⅲ号方联合常规西药治疗脾肾亏虚、浊毒瘀阻型3-5期非透析 慢性肾脏病的临床研究

探讨罗氏肾病Ⅲ号方（由海藻、黄芪、丹参、熟地黄、煅牡蛎、鱼腥草、荆芥穗等组成）联合常规西药治疗脾 肾亏虚、浊毒瘀阻型3-5期非透析慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）的临床效果。【方法】将180例脾肾亏虚、浊毒瘀 阻型3-5期非透析CKD患者随机分为观察组和对照组,每组各90例。对照组给予常规西医对症治疗,观察组在对照组的基 础上联合罗氏肾病Ⅲ号方治疗,疗程均为1个月。观察2组患者治疗前后血清炎症因子水平及肾功能指标、尿蛋白指标的变 化情况,并评价2组患者的临床疗效和安全性。【结果】（1）治疗1个月后,观察组的总有效率为95.56%（86/90）,对照组为 81.11%（73/90）,组间比较（χ2检验）,观察组的疗效明显优于对照组（P＜0.01）。（2）治疗后,2组患者的血清转化生长因子β1 （TGF-β1）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平均较治疗前明显降低（P＜0.05）,且观察组的降低 幅度均明显优于对照组（P＜0.01）。（3）治疗后,2组患者的血尿素氮（BUN）、血清肌酐（Scr）、血尿酸（UA）、胱抑素C（Cys-C） 水平均较治疗前明显降低（P＜0.05）,且观察组的降低幅度均明显优于对照组（P＜0.01）。（4）治疗后,2组患者的24 h尿蛋白 定量和尿微量白蛋白水平均较治疗前明显降低（P＜0.05）,且观察组的降低幅度均明显优于对照组（P＜0.01）。（5）观察组的不 良反应发生率为4.44%（4/90）,明显低于对照组的15.56%（14/90）,组间比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。【结论】罗氏肾 病Ⅲ号方联合常规西药治疗脾肾亏虚、浊毒瘀阻型3-5期非透析CKD患者的临床效果较好,可显著缓解患者机体炎性反 应,改善患者的肾功能,降低患者的尿蛋白排出量,且用药的安全性更高。     

枸杞多糖对精神分裂症模型大鼠海马中GluR1表达及认知功能的影响

目的  探讨枸杞多糖（LBP）对精神分裂症模型（Sz）大鼠海马中GluR1表达及认知功能影响。 方法  选取36只健康SD大鼠,随机分3组,每组12只,分别为正常对照组、模型组及药物干预组（Sz+LBP）。Sz及Sz+LBP腹腔注射地卓西平马来酸盐0.6 mg/（kg·d）,连续注射14 d制造精神分裂症模型,Sz+LBP同时灌胃枸杞多糖100 mg/（kg·d）。正常对照组在相应时段注射等剂量的正常生理盐水。造模成功后,分别评估各组大鼠的行为学改变,进行Morris水迷宫,比较3组大鼠的定位航行和空间探索时间以及采用免疫荧光染色、Western blot法测定海马中GluR1蛋白的表达。结果  Sz的运动量、共济失调、刻板行为评分以及海马中GluR1均高于正常对照组（P <0.01）,Sz+LBP的运动量、共济失调及刻板行为评分均低于Sz,明显抑制精神分裂症大鼠海马中GluR1的表达（P <0.01）。结论  枸杞多糖对精神分裂症模型大鼠海马具有保护作用,其机制与海马中GluR1表达来改善其认知功能相关。

     

鳖甲煎丸抑制肝癌细胞增殖、黏附及侵袭作用的实验研究

目的 研究鳖甲煎丸对肝癌细胞生长增殖、黏附及侵袭能力的影响,初步探讨鳖甲煎丸抗肝癌细胞的转移、侵袭作用机制。方法 运用血清药理学方法,以高、中剂量的鳖甲煎丸含药血清和空白血清分别培养肝癌细胞HepG2,采用MTT 比色法、细胞黏附实验和transwell侵袭实验检测药物对细胞生长、黏附和侵袭作用的影响,以进一步阐明鳖甲煎丸抗肝癌细胞的转移、侵袭作用机制。结果 高剂量和中剂量含药血清可显著抑制肝癌细胞生长增殖,对基底膜的黏附及侵袭穿越迁移亦有抑制作用,且该作用与药物浓度有关。结论 鳖甲煎丸能显著抑制肝癌细胞的生长增殖、黏附及转移侵袭。     

含红芪、黄芪的益气养血汤与补中益气汤含药血清对SAMP8小鼠脾淋巴细胞免疫功能影响的比较研究

目的比较分别含红芪、黄芪的益气养血汤和补中益气汤含药血清对SAMP8小鼠脾淋巴细胞免疫功能影响差别。方法 50只青龄昆明种小鼠随机分为益气养血汤红芪组、益气养血汤黄芪组、补中益气汤红芪组、补中益气汤黄芪组、空白组,每组10只,连续灌胃14天,制备含药血清和空白血清。提取SAMP8小鼠脾淋巴细胞,分为益气养血汤红芪含药血清组、益气养血汤黄芪含药血清组、补中益气汤红芪含药血清组、补中益气汤黄芪含药血清组和空白血清组,以相应含药血清和空白血清培养;SAMP8鼠组和青龄鼠组以完全培养液分别培养SAMP8小鼠和青龄小鼠脾淋巴细胞。不同质量分数(20%、40%、80%)含药血清和空白血清培养SAMP8小鼠脾淋巴细24、48、72 h,MTT法检测各组脾淋巴细胞增殖功能,确定最佳含药血清质量分数和作用时间。另取SAMP8和青龄小鼠脾淋巴细胞,4个含药血清组和空白血清组以最佳质量分数血清培养SAMP8小鼠脾淋巴细胞至最佳作用时间,SAMP8鼠组和青龄鼠组以完全培养液分别培养SAMP8小鼠和青龄小鼠脾淋巴细胞48 h,流式细胞仪检测脾T淋巴细胞表面CD28~+、CD152~+分子的表达,ELISA法检测培养上清液中TNF-α的表达,实时荧光定量PCR和Western Blot检测脾T淋巴细胞PI3K mRNA和蛋白的表达。结果 MTT结果显示,当分别含红芪和黄芪的益气养血汤含药血清质量分数为40%培养48 h,分别含红芪和黄芪的补中益气汤含药血清质量分数为40%培养72 h时,SAMP8小鼠脾淋巴细胞增殖效果最佳。与青龄鼠组比较,SAMP8鼠组小鼠脾T淋巴细胞表面CD28~+分子表达下降,CD152~+分子表达增高(P0.05),TNF-α表达及PI3K mRNA和蛋白表达降低(P0.05)。与空白血清组比较,分别含红芪和黄芪的益气养血汤和补中益气汤含药血清组小鼠脾T淋巴细胞表面CD28~+分子表达升高,CD152~+分子表达降低(P0.05),TNF-α表达及PI3K mRNA和蛋白表达均升高(P0.05)。益气养血汤红芪含药血清组和益气养血汤黄芪含药血清组CD28~+分子表达分别高于补中益气汤红芪含药血清组和补中益气汤黄芪含药血清组(P0.05)。与益气养血汤黄芪含药血清组比较,益气养血汤红芪含药血清组及补中益气黄芪含药血清组PI3K mRNA表达增高(P0.05);与补中益气汤红芪含药血清组比较,益气养血汤红芪含药血清组及补中益气汤黄芪含药血清组PI3K mRNA表达降低(P0.05)。结论含红芪的益气养血汤和补中益气汤含药血清在上调SAMP8小鼠脾T淋巴细胞PI3K mRNA表达上更具优势;含红芪和黄芪的益气养血汤含药血清在上调CD28~+分子表达上优于含红芪和黄芪的补中益气汤含药血清,但在调节PI3K mRNA表达上,含红芪和黄芪的补中益气汤含药血清更具优势。     

广东地区亚健康状态与中医体质的相关性研究

目的探讨广东人群亚健康状态与中医体质的相关性。方法于2012—2013年对24 159人（12~80岁）开展大样本、多中心的横断面调查；健康状况的判定主要结合被调查者的体检报告及《亚健康评定量表》，中医体质的评估使用《中医体质分类与判定表》。结果亚健康状态的现患率为46.0%（11 121/24 159），疾病为35.2%（8 505/24 159）。偏颇体质在亚健康状态和疾病状态中所占的比例比较高，而平和质在健康人群中所占的比例最高。多元回归分析显示中医体质对健康状态有显著影响（P<0.001），与偏颇体质比较，平和质与亚健康危险降低显著相关（OR 0.23， 95%CI：0.21-0.25， P<0.001）；与疾病危险降低也显著相关（OR 0.11， 95%CI： 0.10-0.12， P<0.001）。偏颇体质与亚健康状态危险增加密切相关（P<0.001），如气虚质OR 10.44 （95%CI： 8.86-12.30）、阴虚质OR 4.31（95%CI： 3.71-5.01） 、阳虚质OR 3.51（95%CI： 3.02-4.08） 、湿热质OR 4.11（95%CI： 3.58-4.73） 、痰湿质OR 7.19 （95%CI： 5.88-8.81） 、气郁质OR 21.17（95%CI： 15.74-28.45） 、血瘀质OR 7.27（95%CI： 5.71-9.25）、特禀质OR 3.68（95%CI： 2.90-4.67）。结论亚健康状态与中医体质密切相关，偏颇体质是亚健康的危险因素，平和质是亚健康的保护因素。     

EGCG乙酸酯的HIV融合抑制活性及其作用机制研究

 目的：研究EGCG乙酸酯的HIV融合抑制活性,并探讨其作用靶点。方法：采用HPLC分析pH对于EGCG乙酸酯稳定性的影响以及EGCG乙酸酯在细胞中的水解产物;采用酶联免疫测定法、细胞-细胞融合方法以及假病毒实验检测EGCG乙酸酯抑制HIV与靶细胞融合的活性;应用分子对接软件研究EGCG与gp41的结合位点。结果：EGCG通过其苯环结构和羟基分别与gp41 NHR区域的疏水残基和正电荷残基结合从而抑制病毒的进入。用乙酰基保护EGCG活性酚羟基形成EGCG乙酸酯,稳定性明显增强。EGCG乙酸酯在酶联免疫反应中无活性,但在细胞实验中能有效抑制HIV介导的细胞融合及HIV假病毒感染,其半数抑制浓度IC50分别为（4.93±0.57）和（1.45±0.32） μg?mL-1。EGCG乙酸酯在细胞中的水解产物被证明为EGCG。结论：EGCG乙酸酯在细胞中能转化为母体药物,从而具有HIV融合抑制活性,且靶向作用于HIV gp41。该前药有望研发为稳定、高效的抗HIV药物,用于HIV的治疗。     

当归拈痛汤对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织内外凋亡途径关键因子的影响

目的 观察当归拈痛汤对佐剂性关节炎（AA）大鼠滑膜组织内、外凋亡途径中关键调控因子表达水平的影响,进一步探讨该方防治类风湿关节炎的作用机制。方法 将40只SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、当归拈痛汤组（11.34 g·kg^-1）和雷公藤组（9.45 mg·kg^-1）,除正常组外,其余各组采用灭活结核分支杆菌佐剂建立佐剂性关节炎大鼠模型,于免疫当天开始按分组每日灌胃给药,正常组与模型组大鼠给予等体积生理盐水,持续28 d。观察大鼠一般情况和体质量改变,足趾容积测量仪检测受试大鼠足趾容积的变化,苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠膝关节滑膜组织形态学改变,蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组大鼠滑膜组织肿瘤坏死因子受体超族成员6（Fas）,Fas相关死亡域蛋白（FADD）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）及其共同下游效应分子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3） mRNA和蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠足趾容积显著增加（P<0.01）,滑膜细胞增生显著,滑膜组织Fas,FADD,Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）;与模型组比较,当归拈痛汤组和雷公藤组大鼠的足趾肿胀度显著减轻（P<0.01）,滑膜增生情况明显改善,Fas,FADD,Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显下降（P<0.05,P<0.01）。结论 当归拈痛汤可以有效减轻AA大鼠关节肿胀情况,改善滑膜组织异常增生,其作用机制可能与调控内、外在凋亡途径相关因子Fas,FADD,Bax,Bcl-2,Caspase-3表达,促进滑膜细胞凋亡相关。